Питательная среда Болда (ВВМ)
№ п/п |
Компонент |
Маточный раствор (г/1л дистиллированной Н2О) |
Используемое количество (мл) |
Макроэлементы |
|||
1 |
NaNO3 |
25 |
10 |
2 |
KH2PO4 |
7,5 |
10 |
3 |
K2HPO4 |
7,5 |
10 |
4 |
MgSO4 · 7H2O |
7,5 |
10 |
5 |
CaCI2 · 2H2O |
2,5 |
10 |
6 |
NaCI |
2,5 |
10 |
Микроэлементы |
|||
1 |
ЕДТА (трилон В) |
50,0 |
1 |
КОН |
31,0 |
||
2 |
FeSO4 · 7H2O |
4,98 (999 мл dH2O и 1 мл конц. H2 SO4)
|
1 |
3 |
NaBO3 · 4H20 |
11,42 |
1 |
4 |
ZnSO4 · 7H20 |
8,82 |
1 |
MnCl2 · 4H2О |
1,44 |
||
Mo03 |
0,71 |
||
CuSO4 · 5H2O |
1,57 |
||
Co(NO3)2 · 6H20 |
0,49 (999 мл dH2O и 1 мл конц. H2 SO4)
|
Часто при культивировании зеленых водорослей используют с утроенным количеством азота (3N BBM) т.е. для приготовления первого маточного раствора берут 75 г NaNO3 и растворяют в 1 л дистиллированной Н2О. Увеличение количества азота в среде замедляет старение культур и обеспечивает возможность более продолжительного наблюдения за водорослями.
Также к этой прописи элементов для поддержания рН среды желательно добавить солевой буфер TRIS-HCL из расчета 500 мг/л среды.
Источник
Андреева В.М.б Стрелкова Л.А. Коллекция культур водорослей в лаборатории альгологии Ботанического института им. Комарова АН СССР // Культивирование коллекционных штаммов водорослей. Л., 1983, с. 92-104.
Питательная среда WC
№ п/п |
Компонент |
Маточный раствор (г/1л дистиллированной Н2О) |
Используемое количество (мл) |
1 |
Tris (HCI) |
- |
500 мг |
2 |
NaNO3 |
85.01 |
1 |
3 |
CaCl2 · 2H2O |
36.76 |
1 |
4 |
MgSO4·7H2O |
36.97 |
1 |
5 |
NaHCO3 |
12.60 |
1 |
6 |
Na2SiO3 · 9H2O |
28.42 |
1 |
7 |
K2 HPO4 |
8.71 |
|
8 |
Раствор микроэлементов |
(смотри ниже) |
1 |
9 |
Раствор витаминов |
(смотри ниже) |
1 |
Раствор микроэлементов для среды WC.
К 950 мл дистиллированной воды добавить компоненты и довести объем раствора до 1 литра.
№ п/п |
Компонент |
Маточный раствор (г/1л дистиллированной Н2О) |
Используемое количество |
1 |
Na2EDTA·2H2O |
— |
4.36г |
2 |
FeCl3 ·6H2O |
— |
3.15г |
3 |
CuSO4 ·5H2O |
10.0 |
1 мл |
4 |
ZnSO4 ·7H2O |
22.0 |
1 мл |
5 |
CoCl2 ·6H2O |
10.0 |
1 мл |
6 |
MnCl2 ·4H2O |
180.0 |
1 мл |
7 |
Na2MoO4 ·2H2O |
6.0 |
1 мл |
8 |
H3BO3 |
— |
1.00 г |
Раствор витаминов для среды WC.
В 950 мл дистиллированной воды растворить тиамин·HCl (витамин В1), добавить по 1 мл стоковых растворов и довести объем до 1 литра дистиллированной водой.
№ п/п |
Компонент |
Маточный раствор (г/1л дистиллированной Н2О) |
Используемое количество |
1 |
Thiamine·HCl (vitamin B1) |
— |
100мг |
2 |
Biotin (vitamin H) |
0.5 |
1мл |
3 |
Cyanocobalamin (vitamin B12) |
0.5 |
1мл |
Для удобства дальнейшего использования полученный раствор можно разлить по 1 мл в микропробирки и заморозить.
Источник
Guillard R. R. L. & Lorenzen C. J. 1972. — Yellow-green algae with chlorophyllide c12. Journal of Phycology 8 (1): 10-14. https://doi.org/10.1111/j.1529-8817.1972.tb03995.x
Питательная среда Z8
Используется для культивирования цианобактерий.
№ п/п |
Компонент |
Используемое количество для приготовления стокового раствора |
Используемое количество для приготовления питательной среды |
Стоковый раствор №1 |
10 мл |
||
1 |
NaNO3 |
46.7 г |
|
2 |
Ca(NO3)2 · 4H2O |
5.9 г |
|
3 |
MgSO4 · 7H2O |
2.5 г |
|
Растворить компоненты в дистиллированной воде и довести до 1 л. Автоклавировать при 121°C 15-20 мин. |
|||
Стоковый раствор №2 |
10 мл |
||
1 |
K2HPO4 |
3.1 г |
|
2 |
Na2CO3 |
2.1 г |
|
Растворить компоненты в дистиллированной воде и довести до 1 л. Автоклавировать при 121°C 15-20 мин. |
|||
Стоковый раствор №3 |
10 мл |
||
Раствор железа: 2,80 г FeCl3 · 6H2O растворить в 100 мл 0,1 N. раствора HCl Раствор EDTA: 3,90 г EDTA-Na2 растворить в 100 мл 0,1 N NaOH. 10 мл раствора железа растворить в 900 мл dH2O и добавить 9,5 мл раствора ЭДТА, довести до 1 литра. Не автоклавировать. Хранить при Т 4⁰С. |
|||
Стоковый раствор №4 |
|||
1 |
Na2WO4 · 2H2O |
0.330 г/100 мл |
1 мл |
2 |
(NH4)6Mo7O24 · 4H2O |
0.880 г/100 мл |
|
3 |
KBr |
1.20 г/100 мл |
|
4 |
KJ |
0.83 г/100 мл |
|
5 |
ZnSO4 · 7H2O |
2.87 г/100 мл |
|
6 |
Cd(NO3)2 · 4H2O |
1.55 г/100 мл |
|
7 |
Co(NO3)2 · 6H2O |
1.46 г/100 мл |
|
8 |
CuSO4 · 5H2O |
1.25 г/100 мл |
|
9 |
NiSO4(NH4)2SO4 · 6H2O |
1.98 г/100 мл |
|
10 |
Cr(NO3)3 · 9H2O |
0.410 г/100 мл |
|
11 |
V2O5 |
0.0890 г/1000 мл |
|
12 |
KAl (SO4)2 · 12H2O |
4.74 г/100 мл |
|
13 |
H3BO3 |
3.10 г |
|
MnSO4 · H2O |
1.60 г/1000 мл |
||
К 700 мл d H2O добавить по 1 мл растворов 1-10 и 12, 10 мл раствора 11 и 100 мл раствора 13. Довести до 1 литра. Автоклавировать при 121°C 15-20 мин. |
К 950 мл d H2O добавить 500 мг TRIS-HCL, по 10 мл стоковых растворов №1, №2, №3 и 1 мл стокового раствора №4, довести до 1 л. Автоклавировать при 121°C 15-20 мин.
Источники
Kotai, J. 1972. Instructions for Preparation of Modified Nutrient Solution Z8 for Algae. Norwegian Institute for Water Research, Blindern, Oslo, 5 pp.
Rippka R., 1988. Isolation and purification of cyanobacteria. Methods in Enzymology. 167: 3-27.
Питательная среда ESAW (36 ‰) в модификации Поляковой и соавторов.
Используется для культивирования морских микроводорослей.
№ п/п |
Компонент |
Запасной раствор (г/л dH2O) |
Используемое количество для приготовления 1 л среды (36 ‰) |
Безводные соли |
|||
1 |
NaCl |
– |
24,490 г |
2 |
Na2SO4 |
– |
4,102 г |
3 |
KCl |
– |
0,692 г |
4 |
NaHCO3 |
– |
0,201 г |
5 |
KBr |
– |
0,100 г |
6 |
H3BO3 |
– |
0,027 г |
7 |
NaF |
– |
0,003 г |
Гидратированные соли |
|||
8 |
MgCl2·6H2O |
– |
11,084 г |
9 |
CaCl2·2H2O |
– |
– |
10 |
CaCl2·6H2O |
– |
2,313 г |
11 |
SrCl2·6H2O |
– |
2,313 г |
Раствор тиосульфата натрия |
|||
12 |
Na2S2O3·5H2O |
4,00 |
1,0 мл |
Na2CO3 |
0,02 |
||
Главные биогенные элементы |
|||
13 |
NaNO3 |
46,67 |
0,75 мл |
14 |
NaH2PO4·H2O |
3,094 |
0,75 мл |
15 |
Na2SiO3·9H2O |
15,00 |
2,0 мл |
Раствор Fe-ЭДТА |
|||
16 |
Na2EDTA·2H2O |
2,44 |
1,0 мл |
FeCl3·6H2O |
1,77 |
||
17 |
Микроэлементы (из запасного раствора) |
см. ниже |
1,0 мл |
18 |
Витамины (из запасного раствора) |
см. ниже |
согласно рецепту |
Запасной раствор микроэлементов
№ п/п |
Компонент |
Запасной раствор (г/л dH2O) |
Используемое количество |
1 |
Na2EDTA·2H2O |
|
3,09 г |
2 |
ZnSO4·7H2O |
– |
0,073 г |
3 |
CoSO4·7H2O |
– |
0,016 г |
4 |
MnSO4·4H2O |
– |
0,54 г |
5 |
Na2MoO4·2H2O |
1,48 |
1 мл |
6 |
Na2SeO3 |
0,173 |
1 мл |
7 |
NiCl2·6H2O |
1,49 |
1 мл |
Запасной раствор витаминов
Компонент |
Запасной раствор (г/л dH2O) |
Используемое количество (мл) |
Cyanocobalamin (витамин B12) |
0,02 |
10 |
Thiamine · HCl (витамин B1) |
0,5 |
10 |
Источник
Полякова С.Л., Давидович О.И., Подунай Ю.А., Давидович Н.А. Модификация среды ESAW, используемой для культивирования морских диатомовых водорослей Морской биологический журнал. – 2018. – T. 3, № 2. – С. 73–78. https://doi.org/10.21072/mbj.2018.03.2.06